操作过程中可能出现的问题和解决方法
- 2025-10-26 佚名
操作过程中可能出现的问题和解决方法:(表格)
没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水
问题 | 可能原因 | 解决方法 |
显色淡,灵敏度偏低 | 1.试剂盒在运输途中时间太长,温度太高 | 尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温 |
2.试剂盒未充分平衡 | 试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。 | |
3.温度不足最佳反应温度 | 尽量满足温度要求 | |
4.保温时间不足 | 校正定时钟准确定时 | |
5.洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加 | 按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数 | |
6.移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁 | 校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁,最好一次性使用 | |
7.蒸馏水水质有问题 | 使用新鲜合格的蒸馏水 | |
8.底物作用时间不足 | 准确定时 | |
9.酶标仪滤光片设定不正确,滤光片不匹配 | 重新按所须设置滤光片 | |
10.浓缩抗体稀释不正确 | 严格按说明说操作(现用现稀释) | |
背景深,全部呈有色,临界对照OD值超出规定范围 | 1.洗涤不充分,洗后未拍干,样品中其它成分残留或酶标记物残留 | 浓缩洗液准确配制;20倍浓缩洗涤液如有结晶则应让结晶于室温全部溶解后再量取稀释;充分洗涤,彻底拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染 |
2.样品污染 | 样品应新鲜采集,或低温保存,防止污染 | |
3.培养箱温度超过37℃或反应时间过长 | 调整培养箱温度,准确定时 | |
4.吸嘴重复使用,未洗净或消毒不彻底 | 吸嘴尽可能一次性使用 | |
5.蒸馏水被污染 | 使用新鲜蒸馏水 | |
6.酶等试剂混用 | 不同批号试剂勿混用 | |
7.一次实验的标本量过多,加样时间太长,导致实际反应时间延长 | 合理安排实验,避免几块酶标板同时加样 | |
重复性不佳 | 1.样品数量多少不一,加样时间有长有短 | 重复某一样品时,加样时间尽可能与第一次接近 |
2.保温时间不一致,洗涤条件不一致,操作人员不一致 | 重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性 | |
3.加样量不一致 | 样品稀释前应充分混匀,尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴 | |
出现白板,阳性对照不显色 | 1.未加A、B显色液 | 不要漏加A液和B液 |
2.洗涤液配制有误 | 请按说明书所示稀释倍数配制 | |
3.未加酶结合物而认为已加入 | 注意不要漏加 | |
4.终止液误作洗涤液稀释或当底物液使用 | 每次加液前均应看清标签 | |
样本回收率低 | 1.添加浓度量不准确或添加浓度不合适,取样本提取液吹干的量不准确, | 校正移液器,根据曲线来添加最适浓度 |
反应板出现一片白或一片有色或临界对照OD值超出规定范围多是实验中某一环节发生问题,若逐一排除可能原因重复实验仍出现上述情况,可与另一批号试剂盒进行对照以排除试剂盒质量问题的可能性。 | ||